western blot步骤

1、收集蛋白样品(Protein sample preparation）；使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或者组织样品进行裂解。之后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。

3、冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。 便于观察电泳效果和转膜的效果，以及判断蛋白分子量的大小，最好使用预染蛋白质分子量标准。

5、为了电泳的方便起见，可以采用整个SDS-PAGE过程恒压的方式，通常我们把电压设置在 100V，然后设定定时时间为90－120分钟。